病理解説－染色3（多糖類を対象とした染色）

国家試験で出題される特殊染色のうち，「多糖類」を対象とした染色について解説します！染色は覚えることが多いから大変(^-^;)

【更新履歴】
2021.9.11　
・練習問題を追加しました。
2023.11.9
・問17の解答を修正しました。

各見出しの重要度は，過去の臨床検査技師国家試験（第52回～最新回まで）の出題率や覚えやすさなどを考慮して主観で表記しています。国家試験を受ける学生以外の方は無視してかまいません。

このページで紹介する染色法

• PASパス染色
• Alcian blueアルシアンブルー染色
• toluidine blueトルイジンブルー染色
• mucicarmineムチカルミン染色

多糖類の種類（重要度：★★☆☆☆）

最低でもグリコーゲンと酸性粘液多糖類は確実に覚えておこう！

おるてぃ

ペンギンくん

  はーい。

PAS染色・ジアスターゼ消化試験（重要度：★★★★★）

基本事項　

以下の7つを主な対象とした染色です。

• 真菌（Pneumocystis jiroveciiニューモシスチス　　イロベチィを除く）
• 赤痢アメーバ（Entamoeba histolyticaエントアメーバ　　ヒストリティカ）
• グリコーゲン
• 糸球体基底膜
• 粘液（特に印環細胞癌がよく出題！）
• リポフスチン顆粒
• アミロイド

染色原理　

多糖類の1,2-グリコール水酸基を過ヨウ素酸で酸化し，生じたアルデヒド基にSchiff試薬が結合することによって染色されます。
なお，schiff試薬がメセナミン銀錯体に代わったものがPAM染色です。

染色対象・染色液・染色結果　

染色対象

※酸性粘液多糖類以外の多糖類を染める。
※単多糖：単純多糖類　　　　酸多糖：酸性粘液多糖類
　酸粘：酸性粘液　　　　　　中粘：中性粘液
　ヒア：ヒアルロン酸　　　　コン：コンドロイチン硫酸　　　ヘパ：ヘパリン
　シアロ：シアロムチン　　　スルフォ：スルフォムチン

染色液

• 過ヨウ素酸水溶液
• Schiff試薬（塩基性フクシン）
• 亜硫酸水
  ※亜硫酸水素ナトリウム（重亜硫酸ナトリウム）含有。
• Mayerのhematoxylin

染色結果

• グリコーゲン
• 糖蛋白（酸性・中性粘液）
• 真菌
• 赤痢アメーバ
• リポフスチン
• 糸球体基底膜
• アミロイド
  ＝赤紫色（Schiff試薬）
• 線維素や膠原線維など＝ピンク色（PAS陰性）
• 核＝青紫色（hematoxylin）

出典：厚生労働省ホームページ　第57回臨床検査技師国家試験の問題および正答について　午後問題別冊（https://www.mhlw.go.jp/topics/2011/04/dl/tp_siken_57_rinken_04.pdf）

↑PAS染色（腎臓）

出典：厚生労働省ホームページ　第62回臨床検査技師国家試験の問題および正答について　午後問題別冊（https://www.mhlw.go.jp/seisakunitsuite/bunya/kenkou_iryou/iryou/topics/dl/tp160411-05pm_02.pdf）

↑PAS染色（大腸－赤痢アメーバ）

ジアスターゼ消化試験　

ペンギンくん

  ジアスターゼって何？

でんぷんを分解する酵素で，アミラーゼのことだよ！

おるてぃ

基本事項

PAS染色陽性物質がグリコーゲンであるかどうかを確認する試験です。
グリコーゲンだった場合，ジアスターゼによって加水分解されるためPAS染色が陰性となります。

染色結果

• PAS染色陽性物質がグリコーゲン＝PAS染色陰性化
• PAS染色陽性物質がグリコーゲン以外＝PAS染色陽性

Alcian blue染色（重要度：★★★★☆）

基本事項　

酸性粘液多糖類と酸性粘液を対象とした染色法です。

PAS染色を用いて重染色をすることもあります。
（その場合はAlcian blueから染色します）

染色原理　

染色液＝pH2.5

Alcian blueが酸性粘液多糖類・酸性粘液のカルボキシル基と硫酸基に結合して青色を呈します。

染色液＝pH1.0

Alcian blueが酸性粘液多糖類・酸性粘液の硫酸基にのみ結合して青色を呈します。

染色対象・染色結果　

染色対象

pH2.5 ver

※酸性～～を染める。
※単多糖：単純多糖類　　　　酸多糖：酸性粘液多糖類
　酸粘：酸性粘液　　　　　　中粘：中性粘液
　ヒア：ヒアルロン酸　　　　コン：コンドロイチン硫酸　　　ヘパ：ヘパリン
　シアロ：シアロムチン　　　スルフォ：スルフォムチン

pH1.0 ver

※酸性～～のうち，硫酸基を持つコンドロイチン硫酸・ヘパリン・スルフォムチンを染める。
※単多糖：単純多糖類　　　　酸多糖：酸性粘液多糖類
　酸粘：酸性粘液　　　　　　中粘：中性粘液
　ヒア：ヒアルロン酸　　　　コン：コンドロイチン硫酸　　　ヘパ：ヘパリン
　シアロ：シアロムチン　　　スルフォ：スルフォムチン

染色結果

• 酸性粘液多糖類・酸性粘液＝青色（Alcian blue）

出典：厚生労働省ホームページ　第64回臨床検査技師国家試験の問題および正答について　午前問題別冊（https://www.mhlw.go.jp/seisakunitsuite/bunya/kenkou_iryou/iryou/topics/dl/tp180511-07a_02.pdf）

↑Alcian blue染色

toluidine blue染色（重要度：★★★☆☆）

基本事項　

以下の5つを主な対象とした染色です。

• Pneumocystis jiroveciiニューモシスチス　　イロベチィ
• 酸性粘液多糖類（軟骨基質やマスト細胞など）
• 酸性粘液
• アミロイド
• Nissl小体

なお，軟骨基質・マスト細胞・アミロイドはメタクロマジー（異染性）を示す代表的な物質として覚えておきましょう。

染色対象・染色結果　

染色対象

※酸性～～を染める。
※単多糖：単純多糖類　　　　酸多糖：酸性粘液多糖類
　酸粘：酸性粘液　　　　　　中粘：中性粘液
　ヒア：ヒアルロン酸　　　　コン：コンドロイチン硫酸　　　ヘパ：ヘパリン
　シアロ：シアロムチン　　　スルフォ：スルフォムチン

染色結果

• 酸性粘液多糖類・酸性粘液・アミロイド＝赤紫色（toluidine blue・メタクロマジー）

mucicarmine染色（重要度：★★☆☆☆）

基本事項　

酸性粘液とCryptococcusを対象とした染色法です。

染色対象・染色結果　

染色対象

※酸性粘液を染める。
※単多糖：単純多糖類　　　　酸多糖：酸性粘液多糖類
　酸粘：酸性粘液　　　　　　中粘：中性粘液
　ヒア：ヒアルロン酸　　　　コン：コンドロイチン硫酸　　　ヘパ：ヘパリン
　シアロ：シアロムチン　　　スルフォ：スルフォムチン

染色結果

• 酸性粘液・Cryptococcus＝赤色（mucicarmine）

多糖類染色まとめ（重要度：★★★★☆）

この表もできれば覚えておいて。

おるてぃ

ペンギンくん

  覚えること，多すぎない？

練習問題

このページの復習だよ。解けるかな？

おるてぃ

問1　塩基性フクシンを用いるのはどれか。2つ選べ。（第52回臨床検査技師国家試験pm27）

1．Ziehl-Neelsen染色
2．Masson trichrome染色
3．van Gieson染色
4．PAS染色
5．PTAH染色

解答を見る

解答：1・4
塩基性フクシンを用いる染色法は以下の3つです。
・PAS染色
・Feulgen反応
・Ziehl-Neelsen染色
1．正しい。
2．誤り。
3．誤り。
4．正しい。
5．誤り。

問2　心筋のH-E染色標本を示す。心筋細胞内の顆粒（矢印）が陽性を示す染色法はどれか。2つ選べ。（第52回臨床検査技師国家試験pm31，一部改変）

出典：厚生労働省ホームページ　第52回臨床検査技師国家試験の問題および正答について　午後問題別冊（https://www.mhlw.go.jp/topics/2006/04/dl/tp0419-5pm-betu.pdf）

1．azan染色
2．Alcian blue染色
3．Kossa反応
4．Masson-Fontana染色
5．PAS染色

解答を見る

解答：4・5
心筋の顆粒といえばリポフスチン顆粒です。
リポフスチン顆粒を対象とする染色法は以下の3つです。
・Masson-Fontana染色
・PAS染色
・Schmorl反応
1．誤り。
2．誤り。
3．誤り。
4．正しい。
5．正しい。

問3　染色原理で正しいのはどれか。（第54回臨床検査技師国家試験pm52）

1．Feulgen反応はRNAの検出に用いられる。
2．過ヨウ素酸は水酸基をカルボキシル基に変える。
3．DNAを塩素で加水分解するとメチル基が生じる。
4．hematoxylin液中の色素は陽性荷電の核酸に結合する。
5．Alcian blue（pH1.0）は硫酸基を有する酸性基質を染める。

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解答：5
1．誤り。DNAの検出です。
2．誤り。アルデヒド基です。
3．誤り。アルデヒド基です。
4．誤り。核酸は陰性荷電です。
5．正しい。

問4　病原体と染色法の組み合わせで正しいのはどれか。2つ選べ。（第54回臨床検査技師国家試験pm53）

1．Aspergillus spp.＝mucicarmine染色
2．Candida spp.＝Grocott染色
3．結核菌＝orcein染色
4．Cryptococcus spp.＝Victoria blue染色
5．赤痢アメーバ＝PAS染色

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解答：2・5
1．誤り。mucicarmine染色はCryptococcusを対象とします。
2．正しい。
3．誤り。orcein染色は弾性線維とHBs抗原を対象とします。
4．誤り。Victoria blue染色は弾性線維とHBs抗原を対象とします。
5．正しい。

問5　肝臓の特殊染色標本を示す。陽性物質で正しいのはどれか。（第55回臨床検査技師国家試験pm55）

出典：厚生労働省ホームページ　第55回臨床検査技師国家試験の問題および正答について　午後問題別冊（https://www.mhlw.go.jp/topics/2009/04/dl/tp0422-5d.pdf）

1．偏光顕微鏡で緑色偏光を呈する。
2．mucicarmine染色で赤色に染まる。
3．Alcian blue染色で青色に染まる。
4．ジアスターゼ消化試験で消失する。
5．toluidine blue染色で異染色性を示す。

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解答：4
肝臓の特殊染色で赤紫色といえばPAS染色であり，肝臓でPAS陽性物質といえばグリコーゲンです。グリコーゲンはジアスターゼ消化試験でPAS染色が陰性化するので4が正解です。
1．誤り。
2．誤り。
3．誤り。
4．正しい。
5．誤り。

問6　卵巣腫瘍のH-E染色標本を示す。病変の同定に有用なのはどれか。（第56回臨床検査技師国家試験am54）

出典：厚生労働省ホームページ　第56回臨床検査技師国家試験の問題および正答について　午前問題別冊（https://www.mhlw.go.jp/topics/2010/04/dl/tp_siken_56_rinken_02.pdf）

1．PAS染色
2．PTAH染色
3．Kossa反応
4．SudanⅢ染色
5．Schmorl反応

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解答：1
卵巣で粘液を含む腫瘍細胞が認められることから，Krukenbergクルーケンベルグ腫瘍が考えられます。Krukenberg腫瘍は胃の印環細胞癌が卵巣に転移したものであり，この腫瘍同定には粘液を染色するPAS染色が有用です。
1．正しい。
2．誤り。
3．誤り。
4．誤り。
5．誤り。

問7　PAS染色が同定に有用な微生物はどれか。2つ選べ。（第56回臨床検査技師国家試験am55）

1．cytomegalovirus
2．Treponema pallidum
3．Aspergillus fumigatus
4．Entamoeba histolytica
5．Mycobacterium tuberculosis

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解答：3・4
PAS染色が有用なのは真菌（Pneumocystis jirovecii除く）と赤痢アメーバ（Entamoeba histolytica）です。
1．誤り。
2．誤り。
3．正しい。
4．正しい。
5．誤り。

問8　特殊染色標本を示す。臓器は何か。（第57回臨床検査技師国家試験pm53）

出典：厚生労働省ホームページ　第57回臨床検査技師国家試験の問題および正答について　午後問題別冊（https://www.mhlw.go.jp/topics/2011/04/dl/tp_siken_57_rinken_04.pdf）

1．心臓
2．肝臓
3．膵臓
4．脾臓
5．腎臓

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解答：5
もはや解説不要の問題ですね。糸球体が見えていることから腎臓が考えられます。
1．誤り。
2．誤り。
3．誤り。
4．誤り。
5．正しい。

問9　特殊染色標本を示す。染色法はどれか。（第57回臨床検査技師国家試験pm54）

出典：厚生労働省ホームページ　第57回臨床検査技師国家試験の問題および正答について　午後問題別冊（https://www.mhlw.go.jp/topics/2011/04/dl/tp_siken_57_rinken_04.pdf）

1．PAM染色
2．PAS染色
3．azan染色
4．PTAH染色
5．Bodian染色

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解答：2
腎糸球体基底膜を見たら，取り敢えず4つの染色法を思い出しましょう。
→azan染色・Masson trichrome染色・PAS染色・PAM染色
後は，基底膜の色で判断しましょう。今回は赤紫色に染まっているため，PAS染色が考えられます。
1．誤り。PAM染色であれば黒色に染まります。
2．正しい。
3．誤り。azan染色であれば青色に染まります。
4．誤り。糸球体基底膜の染色には用いられません。
5．誤り。糸球体基底膜の染色には用いられません。

問10　PAS染色で使用しないのはどれか。（第58回臨床検査技師国家試験am53）

1．塩酸
2．アニリン
3．過ヨウ素酸
4．塩基性フクシン
5．重亜硫酸ナトリウム

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解答：2
難問。余裕があれば勉強する程度で十分です。
1．誤り。
2．正しい。
3．誤り。
4．誤り。
5．誤り。

問11　真菌の染色法はどれか。2つ選べ。（第59回臨床検査技師国家試験pm54）

1．Grocott染色
2．orcein染色
3．PAS染色
4．Warthin-Starry染色
5．Ziehl-Neelsen染色

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解答：1・3
1．正しい。
2．誤り。弾性線維やHBs抗原を対象とした染色です。
3．正しい。
4．誤り。スピロヘータやHelicobacter pyloriを対象とした染色です。
5．誤り。抗酸菌を対象とした染色です。

問12　胃組織のH-E染色標本を示す。診断に有用な染色法はどれか。（第62回臨床検査技師国家試験am52）

出典：厚生労働省ホームページ　第62回臨床検査技師国家試験の問題および正答について　午前問題別冊（https://www.mhlw.go.jp/seisakunitsuite/bunya/kenkou_iryou/iryou/topics/dl/tp160411-05am_02_01.pdf）

1．PAS染色
2．azan染色
3．Grocott染色
4．SudanⅢ染色
5．Klüver-Barrera染色

解答を見る

解答：1
胃で粘液を含む腫瘍細胞が認められることから，印環細胞癌が考えられます。この腫瘍同定には粘液を染色するPAS染色が有用です。
1．正しい。
2．誤り。
3．誤り。
4．誤り。
5．誤り。

問13　大腸病変部の染色標本を示す。染色法はどれか。（第62回臨床検査技師国家試験pm53）

出典：厚生労働省ホームページ　第62回臨床検査技師国家試験の問題および正答について　午後問題別冊（https://www.mhlw.go.jp/seisakunitsuite/bunya/kenkou_iryou/iryou/topics/dl/tp160411-05pm_02.pdf）

1．PAS染色
2．Gram染色
3．orcein染色
4．Grocott染色
5．Ziehl-Neelsen染色

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解答：1
画像には赤痢アメーバ（Entamoeba histolytica）が確認できます。赤痢アメーバの染色法はPAS染色です。
1．正しい。
2．誤り。
3．誤り。
4．誤り。
5．誤り。

問14　胃癌摘出時の郭清リンパ節標本を示す。染色法はどれか。（第63回臨床検査技師国家試験pm54）

出典：厚生労働省ホームページ　第63回臨床検査技師国家試験の問題および正答について　午後問題別冊（https://www.mhlw.go.jp/seisakunitsuite/bunya/kenkou_iryou/iryou/topics/dl/tp170425-07b_02.pdf）

1．PAS染色
2．Berlin blue染色
3．Alcian blue染色
4．mucicarmine染色
5．toluidine blue染色

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解答：3
深く考えずとも，染色の色合い（青色）から判断できる問題です。
1．誤り。赤紫色でないので否定できます。
2．誤り。Berlin blue染色も青色ですが，対象が3価鉄であることから否定できます。
3．正しい。色合いと染色対象（酸性粘液）から最も考えられる染色法です。
4．誤り。赤色でないので否定できます。
5．誤り。赤紫色でないので否定できます。

問15　軟骨組織の特殊染色標本を示す。染色法はどれか。（第64回臨床検査技師国家試験am52）

出典：厚生労働省ホームページ　第64回臨床検査技師国家試験の問題および正答について　午前問題別冊（https://www.mhlw.go.jp/seisakunitsuite/bunya/kenkou_iryou/iryou/topics/dl/tp180511-07a_02.pdf）

1．azan染色
2．Berlin blue染色
3．Alcian blue染色
4．mucicarmine染色
5．toluidine blue染色

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解答：3
染色対象が軟骨組織（＝酸性粘液多糖類）であることから，考えられる染色法はAlcian blue染色とtoluidine blue染色の2つです。後は色合いで判断です。
1．誤り。
2．誤り。
3．正しい。
4．誤り。mucicarmine染色では酸性粘液多糖類は染まりません。
5．誤り。toluidine blue染色であればメタクロマジーにより軟骨組織は赤紫色に染まります。

問16　toluidine blue染色で異染性を示すのはどれか。（第60回臨床検査技師国家試験pm55）

1．脂肪
2．メラニン
3．軟骨基質
4．胆汁色素
5．ヘモジデリン

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解答：3
軟骨基質・マスト細胞・アミロイドはメタクロマジー（異染性）を示す代表的な物質です。
1．誤り。
2．誤り。
3．正しい。
4．誤り。
5．誤り。

問17　toluidine blue染色で異染性を示すのはどれか。（第62回臨床検査技師国家試験am53）

1．好中球
2．赤血球
3．組織球
4．形質細胞
5．肥満細胞

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解答：5
軟骨基質・マスト細胞・アミロイドはメタクロマジー（異染性）を示す代表的な物質です。
1．誤り。
2．誤り。
3．誤り。
4．誤り。
5．正しい。

問18　toluidine blue染色で異染性を示すのはどれか。（第64回臨床検査技師国家試験pm52）

1．膠原線維
2．脂肪細胞
3．心筋線維
4．神経線維
5．軟骨基質

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解答：5
軟骨基質・マスト細胞・アミロイドはメタクロマジー（異染性）を示す代表的な物質です。
1．誤り。
2．誤り。
3．誤り。
4．誤り。
5．正しい。